Abnbio 0.25胰(yi)酶(mei)溶液(ye) 100ml

產(chan)品(pin)說(shuo)明：

在組(zu)織細胞的(de)體(ti)外培(pei)養和原(yuan)代(dai)細胞培(pei)養中(zhong)的組(zu)織細胞分(fen)散(san)（將組(zu)織塊制(zhi)備成(cheng)單個細(xi)胞懸(xuan)液(ye)）以(yi)及(ji)傳(chuan)代(dai)細(xi)胞培(pei)養中(zhong)，貼(tie)壁生長(chang)細(xi)胞的(de)消(xiao)化(hua)分(fen)散(san)均要(yao)使(shi)用(yong)組(zu)織細胞消(xiao)化(hua)液(ye)。常用(yong)的(de)消(xiao)化(hua)液(ye)為，EDTA等，其功(gong)能(neng)主(zhu)要(yao)是(shi)使(shi)細(xi)胞間的蛋(dan)白質(zhi)（如(ru)細(xi)胞外基質）水(shui)解，使(shi)組(zu)織或(huo)貼(tie)壁細(xi)胞分(fen)散(san)成(cheng)單個細(xi)胞，制(zhi)成(cheng)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)用(yong)於進(jin)壹(yi)步(bu)的(de)實(shi)驗(yan)。

-EDTA消(xiao)化(hua)液(ye)(Trypsin-EDTASolution)含(han)0.25%和0.02�TA（0.53mM），溶(rong)於無(wu)鈣鎂鹽(yan)溶液(ye)中(zhong)，經過濾除(chu)菌，可以直(zhi)接(jie)用(yong)於培(pei)養細胞和組(zu)織的消(xiao)化(hua)。-EDTA消(xiao)化(hua)液(ye)具(ju)有(you)方便快速(su)、穩(wen)定(ding)安(an)全、細胞狀(zhuang)態(tai)好(hao)等特點。通(tong)常室(shi)溫消化(hua)2分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)就(jiu)可以(yi)消化(hua)下(xia)大多數貼(tie)壁細(xi)胞。-EDTA消(xiao)化(hua)液(ye)有(you)含酚(fen)紅和不(bu)含(han)酚(fen)紅2類產(chan)品(pin)，酚(fen)紅具(ju)有(you)pH 指示(shi)作用。

使用方(fang)法：

1. 貼(tie)壁細(xi)胞的(de)消(xiao)化(hua)：

a) 吸(xi)去培(pei)養液，用無菌的PBS、Hanks 液或(huo)無(wu)血清(qing)培(pei)養液洗滌(di)細(xi)胞壹(yi)次(ci)，以(yi)去除(chu)殘余(yu)的(de)血清。b) 加(jia)入(ru)少(shao)量(liang)-EDTA消化(hua)液(ye)，蓋(gai)過細胞即(ji)可(ke)，室(shi)溫放(fang)置(zhi)1-2分(fen)鐘(zhong)。不(bu)同的細(xi)胞消(xiao)化(hua)時(shi)間有(you)所(suo)不(bu)同，對(dui)於貼(tie)壁牢(lao)固的(de)細胞可(ke)適(shi)當(dang)延長消化(hua)時(shi)間。

c) 顯(xian)微鏡下觀察，細(xi)胞明顯(xian)收縮(suo)，並且肉眼(yan)觀(guan)察培(pei)養器皿(min)底部發現(xian)細胞的(de)形態(tai)發生明顯(xian)的規(gui)格100ml 100ml 備(bei)註不含酚(fen)紅含酚(fen)紅

變化(hua)；或(huo)者(zhe)用槍(qiang)吹打細(xi)胞發(fa)現(xian)細胞剛好(hao)可以被吹打下(xia)來。此(ci)時(shi)吸(xi)除(chu)消化(hua)液(ye)。加(jia)入(ru)含血(xue)清的細胞培(pei)養液，吹打下(xia)細(xi)胞，即(ji)可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)於後(hou)續實(shi)驗(yan)。

d) 如(ru)果發現(xian)消化(hua)不(bu)足(zu)，可加(jia)入(ru)-EDTA消化(hua)液(ye)重(zhong)新消(xiao)化(hua)。

e) 如(ru)果發現(xian)細胞消(xiao)化(hua)時(shi)間過長，未及(ji)吹打細(xi)胞，細(xi)胞已(yi)經有(you)部分直(zhi)接(jie)從培(pei)養器皿(min)底部脫落(luo)，直(zhi)接(jie)用(yong)細胞培(pei)養液把細胞全部吹打下(xia)來。1000-2000g離心(xin)1分(fen)鐘(zhong)，沈(chen)澱(dian)細胞，盡量(liang)去除(chu)細胞消(xiao)化(hua)液(ye)後(hou)，加入(ru)含血(xue)清的培(pei)養液重新懸(xuan)浮(fu)細胞，即(ji)可(ke)用(yong)於後(hou)續實(shi)驗(yan)。

2. 組(zu)織的消(xiao)化(hua)：

不(bu)同的組(zu)織需(xu)要(yao)消(xiao)化(hua)的(de)時(shi)間相差(cha)很大，通(tong)常以(yi)消(xiao)化(hua)後(hou)可以(yi)充分打散(san)組(zu)織為宜。

註意事項：

1．由(you)於組(zu)織或(huo)細(xi)胞性(xing)質不(bu)同，實(shi)驗(yan)人(ren)員應(ying)依(yi)據(ju)具(ju)體情況，確(que)定最(zui)佳(jia)消(xiao)化(hua)時(shi)間；消化(hua)細(xi)胞時(shi)間不宜過長，否(fou)則會影響細(xi)胞貼(tie)壁和生長(chang)狀(zhuang)況；

2．本(ben)產(chan)品(pin)不(bu)含(han)抑(yi)菌劑，在使(shi)用(yong)過程(cheng)中(zhong)要(yao)特別(bie)註意無菌操作，避免消化(hua)液(ye)被(bei)微生物(wu)汙(wu)染(ran)；

3．不宜4℃長(chang)期保存(cun)，切忌(ji)反(fan)復凍(dong)融(rong)，小(xiao)量(liang)使(shi)用(yong)時建議(yi)分裝凍存(cun)；

4．為了(le)您(nin)的(de)安(an)全和健(jian)康(kang)，請(qing)穿(chuan)實(shi)驗(yan)服(fu)並戴(dai)壹(yi)次(ci)性(xing)手套操作。