ABNbio培養基的(de)組成因(yin)實驗(yan)目的(de)和微生物種類的(de)不同(tong)而有(you)所差異,通常(chang)包括碳(tan)源(yuan)、氮(dan)源(yuan)、礦(kuang)物質、維(wei)生素(su)和所需(xu)的(de)微量元素(su)等(deng)。為(wei)了(le)確(que)保(bao)培養的(de)成功(gong),培養基在使用前(qian)要進(jin)行(xing)適當(dang)的(de)滅菌(jun)處理(li),去(qu)除(chu)可(ke)能存在的(de)雜菌(jun)或(huo)其(qi)他汙(wu)染(ran)物。
滅菌(jun)方(fang)法如下(xia):
1. 高壓(ya)蒸(zheng)汽滅(mie)菌(jun)(高壓(ya)滅(mie)菌)
高壓(ya)蒸(zheng)汽滅(mie)菌(jun)是(shi)常(chang)見且(qie)有(you)效的(de)滅菌(jun)方法(fa)之壹(yi),廣泛用於(yu)培養基的(de)滅菌(jun)。其原(yuan)理(li)是(shi)利用高溫和高壓(ya)的(de)蒸汽(qi)來破(po)壞(huai)微生物的(de)蛋白(bai)質(zhi)和核酸(suan)結構(gou),從而(er)殺死微生物。
高壓(ya)蒸(zheng)汽滅(mie)菌(jun)的(de)方法(fa)如下(xia):
操作(zuo)步(bu)驟(zhou):將(jiang)培養基瓶密(mi)封(feng)好,放(fang)入高壓(ya)滅(mie)菌器(qi)中,設(she)定(ding)適當(dang)的(de)溫度和時間(jian),根(gen)據(ju)培養基的(de)量和容(rong)器(qi)的(de)不同(tong),滅菌(jun)時間(jian)可(ke)以(yi)適當(dang)調(tiao)整(zheng)。
適用範(fan)圍:適用於(yu)大部(bu)分(fen)熱(re)穩(wen)定(ding)的(de)培養基,但(dan)不適(shi)用於(yu)易(yi)受(shou)高溫破壞(huai)的(de)培養基成分(fen)。
註(zhu)意事(shi)項:高壓(ya)滅(mie)菌過程中的(de)蒸汽(qi)溫度和壓(ya)力(li)需控制(zhi)精確(que),避(bi)免培養基受到(dao)過度加熱(re),影(ying)響(xiang)其(qi)有(you)效成(cheng)分(fen)。滅(mie)菌後的(de)培養基應迅(xun)速(su)冷(leng)卻(que),以(yi)避(bi)免(mian)出現結晶(jing)或(huo)物質降(jiang)解(jie)。
2. 幹(gan)熱(re)滅(mie)菌(jun)
幹(gan)熱(re)滅(mie)菌(jun)利用高溫空氣(qi)來(lai)殺滅微生物。該方(fang)法(fa)適用於(yu)不含(han)水分(fen)或(huo)含(han)水量非(fei)常(chang)低的(de)培養基,或(huo)者(zhe)壹(yi)些不耐(nai)水的(de)培養基成分(fen)。
幹(gan)熱(re)滅(mie)菌(jun)的(de)操作(zuo)步驟(zhou)如(ru)下:
操作步(bu)驟(zhou):將(jiang)培養基置於(yu)幹(gan)熱(re)滅(mie)菌(jun)器(qi)中,設(she)定(ding)溫度和時間(jian)。對於(yu)壹(yi)些特殊的(de)培養基,溫度和時間(jian)可(ke)以(yi)適當(dang)調(tiao)整(zheng)。
適用範(fan)圍:幹(gan)熱(re)滅(mie)菌(jun)適(shi)用於(yu)熱(re)穩(wen)定(ding)的(de)、無水培養基或(huo)需(xu)要幹(gan)燥的(de)培養基成分(fen)。
註(zhu)意事(shi)項:幹(gan)熱(re)滅(mie)菌(jun)的(de)時間(jian)較(jiao)長(chang),需(xu)要(yao)較(jiao)高的(de)溫度,因此(ci)不適(shi)合(he)處理(li)含水量較(jiao)高的(de)培養基。過高的(de)溫度可(ke)能會破壞(huai)培養基中的(de)成分(fen),導致其失(shi)效。
3. 過濾滅(mie)菌
過濾滅(mie)菌是(shi)壹(yi)種通過物理(li)篩選(xuan)去(qu)除(chu)微生物的(de)滅菌(jun)方法(fa)。它(ta)的(de)原理(li)是(shi)利用具(ju)有(you)壹(yi)定(ding)孔徑的(de)濾膜,將(jiang)微生物從培養基中分(fen)離(li)出去(qu),常(chang)用於(yu)對熱(re)敏(min)感物質進(jin)行(xing)滅菌。
過濾滅(mie)菌的(de)操作(zuo)步驟(zhou)如(ru)下:
操作步(bu)驟(zhou):將(jiang)培養基通過過濾器(qi)進(jin)行(xing)過濾。過濾後(hou),培養基會被收集(ji)到(dao)無菌容(rong)器(qi)中,保(bao)持其(qi)無菌性(xing)。
適(shi)用範(fan)圍:適用於(yu)不能承受高溫的(de)培養基,或(huo)其(qi)中含(han)有(you)熱(re)敏(min)感成分(fen)的(de)培養基。
註意事(shi)項:過濾滅(mie)菌的(de)前提是(shi)培養基中沒(mei)有(you)任(ren)何細小(xiao)顆(ke)粒,過多(duo)的(de)顆粒會阻(zu)塞濾膜,因(yin)此,過濾前(qian)需要(yao)進(jin)行(xing)預處理(li)以去(qu)除(chu)不(bu)溶(rong)物。使用過濾法(fa)時,需(xu)要(yao)確(que)保(bao)過濾器(qi)的(de)質量和孔徑合(he)適。
4. 紫外線(xian)滅(mie)菌(jun)
紫(zi)外(wai)線(xian)滅菌主(zhu)要利用紫(zi)外線對微生物DNA的(de)破壞(huai)來實現滅菌(jun)。雖(sui)然紫(zi)外線滅菌(jun)通常(chang)不直(zhi)接(jie)用於(yu)大規(gui)模培養基滅菌,但(dan)它(ta)可(ke)作(zuo)為(wei)壹(yi)種輔(fu)助(zhu)的(de)滅菌(jun)手段(duan),常(chang)用於(yu)實驗(yan)室(shi)器(qi)具(ju)、環境空氣(qi)或(huo)培養基操作臺的(de)滅菌(jun)。
紫外(wai)線滅(mie)菌(jun)的(de)操作(zuo)步驟(zhou)如(ru)下:
操作步(bu)驟(zhou):將(jiang)培養基容(rong)器(qi)置於(yu)紫外(wai)線燈(deng)照射的(de)區域(yu),根(gen)據(ju)需要的(de)滅菌(jun)時間(jian)調(tiao)整(zheng)曝光時間(jian)。
適用範(fan)圍:適用於(yu)培養基表(biao)面或(huo)周(zhou)圍環(huan)境的(de)滅菌(jun),而不(bu)適合(he)用於(yu)深層(ceng)的(de)培養基處理(li)。
註意(yi)事(shi)項:紫外線滅(mie)菌(jun)的(de)效果(guo)受(shou)到(dao)物品表(biao)面和紫外線強(qiang)度的(de)影響(xiang),因此(ci)需要(yao)確(que)保(bao)均勻照射,以達(da)到(dao)理(li)想(xiang)效果(guo)。
ABNbio培養基的(de)滅菌(jun)方法(fa)選(xuan)擇(ze)直(zhi)接(jie)影響(xiang)培養結果(guo)的(de)準確(que)性(xing)和微生物的(de)生長(chang)情況(kuang)。高壓(ya)蒸(zheng)汽滅(mie)菌(jun)、幹(gan)熱(re)滅(mie)菌(jun)、過濾滅(mie)菌等(deng)方(fang)法(fa)各(ge)有(you)優(you)缺(que)點(dian),選(xuan)擇(ze)合(he)適的(de)方法(fa)能夠(gou)確(que)保(bao)培養基無汙染(ran)且(qie)維持其(qi)有(you)效性(xing)。在(zai)實際應(ying)用中,需(xu)要(yao)根(gen)據(ju)培養基的(de)性(xing)質(zhi)、實驗(yan)需(xu)求以及設備(bei)條(tiao)件(jian)等(deng)因素做出科學合(he)理(li)的(de)選(xuan)擇(ze)。