DMEM(Dulbecco改良Eagle培養基)是(shi)壹種廣(guang)泛(fan)使用的(de)基(ji)礎(chu)培養基,可(ke)用於支持(chi)很(hen)多種(zhong)類(lei)的(de)哺(bu)乳(ru)動(dong)物細胞生長(chang)。已經(jing)在(zai)DMEM中培養成功的(de)細胞包(bao)括原(yuan)代成纖維細胞、神經(jing)元(yuan)、膠質細胞、HUVEC、平滑肌細胞,以及HeLa、293、Cos-7和(he)PC-12等(deng)細胞系。針對(dui)廣泛(fan)的(de)細胞培養應用,提供(gong)了多種(zhong)組分的(de)DMEM改良培養基。使用培養基選(xuan)擇(ze)工具查找適合的(de)配方(fang)。
低(di)糖(tang)培養基的(de)適用場景:
細胞類型:原(yuan)代腫(zhong)瘤(liu)細胞、貼壁依(yi)賴性(xing)強(qiang)的(de)上皮細胞、單克(ke)隆抗(kang)體(ti)融(rong)合實(shi)驗(yan)。
研究領(ling)域:糖代謝(xie)機(ji)制(zhi)、糖(tang)尿病(bing)模(mo)型構(gou)建(jian)、疫苗(miao)生產。
判斷(duan)細胞適應低(di)糖(tang)環境的(de)核(he)心(xin)指標:
代謝(xie)活性(xing)變(bian)化(hua):
糖(tang)酵解(jie)抑(yi)制(zhi):低(di)糖(tang)環境下(xia),若細胞通(tong)過增強(qiang)磷酸戊糖(tang)途(tu)徑(jing)或谷(gu)氨(an)酰胺(an)代謝(xie)維持(chi)能(neng)量供應(ying),表明其適應能(neng)力(li)較(jiao)強(qiang)。
乳(ru)酸(suan)積(ji)累減少(shao):低(di)糖(tang)培養基中(zhong)乳(ru)酸(suan)產量降低(di)40%以上,提示(shi)細胞代謝(xie)轉向更高效途(tu)徑(jing)。
增(zeng)殖(zhi)與周期調(tiao)控:
生長(chang)速(su)率(lv):適應低(di)糖(tang)的(de)細胞在低(di)糖(tang)酸(suan)性(xing)條件(jian)下(xia)S期比例(li)恢復(fu),接近正(zheng)常(chang)培養水(shui)平(ping)。
周期阻(zu)滯(zhi)緩解(jie):通(tong)過流式細胞術檢測,若G2期細胞比例(li)下(xia)降且增殖標誌物表(biao)達(da)穩定,說明(ming)細胞已適應。
分子(zi)標誌物檢(jian)測:
c-Myc通(tong)路激(ji)活:c-Myc及其(qi)下(xia)遊(you)基因(yin)(ASCT2、GLS、PPAT)表達(da)上調(tiao),驅動(dong)谷氨(an)酰胺(an)代謝(xie)和核苷(gan)酸合成。
雕亡(wang)抑制(zhi):BAK/BAX蛋白活(huo)性(xing)降低(di),細胞雕亡(wang)信(xin)號(hao)減弱(如(ru)癌細胞通(tong)過此機(ji)制(zhi)逃(tao)逸化(hua)療殺傷(shang))。