酵母感受態(tai)細胞是通過特(te)殊(shu)處理（如(ru)化(hua)學或物理方法）使(shi)酵母(mu)細胞暫(zan)時具(ju)備吸收外(wai)源(yuan)DNA能(neng)力的(de)細胞，主要(yao)用(yong)於基(ji)因(yin)克隆、蛋(dan)白表達及(ji)酵(jiao)母雙(shuang)雜(za)交(jiao)等(deng)分子生(sheng)物學實(shi)驗(yan)。
轉化成(cheng)功(gong)的判斷標準(zhun)：
菌落形(xing)態(tai)與數(shu)量：
成功(gong)轉化的(de)酵(jiao)母感受態(tai)細胞在選擇性培(pei)養基(ji)上(shang)應(ying)形(xing)成乳(ru)白(bai)色、圓形(xing)、直徑(jing)≥1mm的(de)單(dan)菌(jun)落。
若菌(jun)落過小(xiao)（<0.5mm）或呈彌(mi)散(san)狀（壹層(ceng)菌(jun)膜），則(ze)可(ke)能(neng)為(wei)轉化失(shi)敗(bai)。
轉化效率驗(yan)證(zheng)：
單(dan)質(zhi)粒(li)轉化效率通常(chang)需(xu)達到(dao)10³~10⁵cfu/μgDNA。
文(wen)庫(ku)轉化時(shi)，需(xu)在缺陷(xian)平板(ban)上獲(huo)得≥10⁵個(ge)轉化子（如10μL重懸(xuan)液塗布(bu)後(hou)菌(jun)落數≥10個(ge)。
轉化失(shi)敗(bai)的常(chang)見(jian)原(yuan)因(yin)及(ji)排(pai)查：
質粒(li)問題(ti)：
電泳(yong)檢(jian)測質(zhi)粒(li)是否(fou)完整（條帶明亮(liang)、大(da)小正(zheng)確(que)）。
檢(jian)查質粒(li)是否(fou)攜帶正(zheng)確(que)的(de)篩(shai)選標(biao)記(ji)。
培(pei)養基(ji)與操(cao)作問題(ti)：
確認(ren)選擇性培(pei)養基(ji)配(pei)制正(zheng)確(que)（如(ru)抗(kang)生(sheng)素濃(nong)度(du)、營養缺(que)陷(xian)型(xing)補充(chong)）。
熱激條件需(xu)嚴(yan)格（30℃孵(fu)育(yu)30min+42℃熱激20min）。
細胞狀態(tai)異(yi)常(chang)：
鏡檢(jian)酵母(mu)細胞是否(fou)形(xing)態(tai)正(zheng)常(chang)（卵圓形(xing)、無裂(lie)解(jie)）。
活細胞比(bi)例(li)需高（可通過亞(ya)甲(jia)基(ji)藍染色法(fa)驗(yan)證(zheng)，活細胞無色）。
歡迎來(lai)到(dao)