酵母(mu)感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)的(de)存儲方式是(shi)什(shen)麽？

　　酵(jiao)母(mu)感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)是指(zhi)通過(guo)物(wu)理(li)或(huo)化(hua)學(xue)方(fang)法處理，使(shi)其(qi)在短(duan)時間內(nei)能夠(gou)吸收(shou)外源(yuan)DNA分(fen)子(zi)（如(ru)質粒或(huo)基因片段）的(de)酵母(mu)細胞(bao)。這(zhe)些細胞(bao)通常(chang)處於(yu)壹(yi)種(zhong)“非(fei)自(zi)然”狀態(tai)，能夠(gou)克服正常(chang)細胞(bao)膜(mo)的(de)屏障(zhang)，將外源(yuan)DNA成(cheng)功引入。廣泛(fan)應(ying)用(yong)於(yu)基因克隆、蛋白表(biao)達、基因編(bian)輯(ji)、基因敲(qiao)除等分(fen)子(zi)生物(wu)學(xue)實(shi)驗(yan)。由於(yu)其在細(xi)胞(bao)工程中(zhong)的(de)重要(yao)性(xing)，如(ru)何(he)有(you)效地保存這些感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)以保(bao)證其長(chang)期(qi)的(de)穩定性(xing)和高效性(xing)，成(cheng)為了(le)研(yan)究(jiu)人(ren)員(yuan)關註(zhu)的(de)重要(yao)問(wen)題(ti)。

　　保(bao)存方法主要(yao)分(fen)為(wei)兩(liang)類：冷(leng)凍(dong)保(bao)存法和液氮(dan)保(bao)存法。這兩(liang)種(zhong)方法(fa)在不(bu)同的(de)研究(jiu)環境下有各(ge)自的(de)優缺(que)點(dian)。以下是常(chang)見的(de)保存方法詳細(xi)分(fen)析(xi)：

　　壹(yi)、冷(leng)凍(dong)保(bao)存法

　　冷(leng)凍(dong)保(bao)存法是常(chang)用(yong)的(de)壹(yi)種(zhong)保存方法。其主(zhu)要(yao)原(yuan)理(li)是通(tong)過(guo)低(di)溫(wen)降(jiang)低(di)細(xi)胞(bao)的(de)代謝(xie)活(huo)動，從(cong)而延緩細(xi)胞(bao)的(de)老化(hua)過(guo)程，並(bing)保(bao)持(chi)其在轉(zhuan)化(hua)過(guo)程中(zhong)所需的(de)活(huo)性。冷(leng)凍(dong)保(bao)存常(chang)用(yong)的(de)方式(shi)是通(tong)過(guo)添(tian)加甘油來(lai)保護(hu)細(xi)胞，在低(di)溫(wen)下進行長(chang)期(qi)保存。

　　步(bu)驟(zhou)：

　　1.制(zhi)備感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)：首(shou)先需要(yao)按(an)照標(biao)準(zhun)操(cao)作流程制(zhi)備感(gan)受(shou)態(tai)酵母(mu)細胞(bao)，通常(chang)使用(yong)氯化鋰法或(huo)電(dian)轉化法來(lai)提高(gao)細胞(bao)的(de)感(gan)受(shou)態(tai)能力。

　　2.添加保(bao)護(hu)劑(ji)：在感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)中加入(ru)適(shi)量(liang)的(de)甘油。甘油具有(you)防(fang)止冰(bing)晶(jing)形(xing)成(cheng)的(de)作用(yong)，可(ke)以減(jian)少細胞(bao)在冷(leng)凍(dong)過(guo)程中(zhong)的(de)損傷(shang)。

　　3.分裝保(bao)存：將含有甘油的(de)感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)分裝(zhuang)到(dao)無(wu)菌(jun)的(de)凍(dong)存管中，確(que)保(bao)每管細(xi)胞的(de)數量(liang)適中(zhong)，避(bi)免(mian)凍(dong)存過(guo)程中(zhong)細(xi)胞(bao)數量過(guo)多(duo)導致(zhi)無(wu)法(fa)均(jun)勻分(fen)配(pei)。

　　4.低(di)溫(wen)保存：將分(fen)裝(zhuang)好的(de)細胞(bao)放入(ru)冷(leng)凍(dong)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)保存。

　　二、液(ye)氮(dan)保存法

　　液氮保(bao)存法是另壹(yi)種(zhong)常(chang)用(yong)長(chang)期(qi)保存方法。液氮(dan)的(de)溫(wen)度低(di)，可(ke)以降(jiang)低(di)細(xi)胞(bao)代謝(xie)活(huo)動，基本(ben)實(shi)現細胞(bao)的(de)“停滯(zhi)”狀(zhuang)態。液氮保存方法適用(yong)於(yu)需要(yao)長(chang)期(qi)保存感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)的(de)情況，能夠保留(liu)細胞(bao)的(de)活(huo)性和轉化(hua)能(neng)力。

　　步(bu)驟(zhou)：

　　1.制(zhi)備感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)：與冷(leng)凍(dong)保(bao)存法壹(yi)樣，首(shou)先需要(yao)使(shi)用(yong)化(hua)學(xue)或(huo)電(dian)轉化法制(zhi)備。

　　2.添(tian)加保(bao)護(hu)劑(ji)：為(wei)了(le)防(fang)止(zhi)細(xi)胞(bao)在凍(dong)存過(guo)程中(zhong)的(de)冰晶(jing)損傷(shang)，通常(chang)在感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)中添(tian)加甘油作為(wei)保(bao)護(hu)劑(ji)。

　　3.分(fen)裝(zhuang)與凍(dong)存：將含有保(bao)護(hu)劑(ji)的(de)感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)分裝(zhuang)在凍(dong)存管中，並(bing)迅(xun)速放(fang)入液(ye)氮(dan)罐(guan)中保(bao)存。液氮的(de)低(di)溫(wen)可以確(que)保(bao)細胞的(de)長(chang)期(qi)穩定性(xing)。

　　4.使(shi)用(yong)時解凍(dong)：使(shi)用(yong)時，可以將液(ye)氮(dan)中的(de)細胞(bao)取出(chu)，放(fang)置(zhi)在水(shui)浴(yu)中快(kuai)速解凍(dong)，然後恢(hui)復培養。

　　三、冷(leng)凍(dong)幹燥法(fa)（凍(dong)幹法）

　　冷(leng)凍(dong)幹燥法(fa)（即(ji)凍(dong)幹法）是(shi)通(tong)過(guo)將細(xi)胞(bao)中的(de)水分(fen)去(qu)除，將酵(jiao)母(mu)感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)轉變(bian)為凍(dong)幹粉(fen)末(mo)，從(cong)而實現長(chang)期(qi)保存。凍(dong)幹後的(de)酵母(mu)細胞(bao)可(ke)以在室(shi)溫(wen)下保存，取用(yong)時再通(tong)過(guo)復(fu)水(shui)進(jin)行(xing)恢復。

　　步(bu)驟(zhou)：

　　1.細(xi)胞(bao)制(zhi)備：和其他(ta)保存方法壹(yi)樣，首(shou)先制(zhi)備感(gan)受(shou)態(tai)酵母(mu)細胞(bao)。

　　2.凍(dong)幹處理(li)：將細(xi)胞(bao)懸浮(fu)液(ye)分(fen)裝(zhuang)到(dao)凍(dong)幹瓶中(zhong)，通(tong)過(guo)凍(dong)幹機進行(xing)冷(leng)凍(dong)和幹燥。

　　3.保(bao)存：凍(dong)幹後的(de)細胞(bao)可以在幹燥、陰(yin)涼的(de)地方保存，避免(mian)潮(chao)濕。

　　4.復(fu)水(shui)使(shi)用(yong)：使(shi)用(yong)時，只需加入(ru)適(shi)量(liang)的(de)無(wu)菌(jun)水進行(xing)復水(shui)即(ji)可。

　　酵(jiao)母(mu)感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)的(de)長(chang)期(qi)保存是壹(yi)項(xiang)關(guan)鍵(jian)技(ji)術，其(qi)保存方法和技(ji)巧(qiao)直(zhi)接影響到(dao)實驗(yan)的(de)結果(guo)和效率(lv)。通過(guo)選(xuan)擇(ze)