發(fa)根(電(dian)擊)感受(shou)態(tai)細胞的制(zhi)備(bei)

　　感受(shou)態細胞是(shi)指處於壹(yi)種(zhong)能(neng)高(gao)效(xiao)吸(xi)收(shou)和整合外(wai)源(yuan)DNA狀態的細胞。而(er)發根(電(dian)擊)感受(shou)態(tai)細胞則(ze)是(shi)在電(dian)擊(ji)條(tiao)件下制(zhi)備(bei)的感(gan)受(shou)態(tai)細胞，這(zhe)種(zhong)細胞常用(yong)於基(ji)因(yin)克(ke)隆(long)、基(ji)因(yin)功(gong)能(neng)研(yan)究、蛋(dan)白(bai)質(zhi)生(sheng)產(chan)等(deng)生(sheng)物(wu)技術領(ling)域(yu)。
 

　　壹、發(fa)根(電(dian)擊)感受(shou)態(tai)細胞的制(zhi)備(bei)
 

　　電(dian)擊(ji)轉(zhuan)化(hua)是(shi)將(jiang)外源(yuan)DNA引入(ru)細菌或其(qi)他(ta)細胞的壹(yi)種(zhong)方(fang)法(fa)。在電(dian)擊(ji)的作(zuo)用(yong)下，細胞膜(mo)上(shang)會形(xing)成臨(lin)時(shi)的孔(kong)洞(dong)，此(ci)時(shi)如(ru)果(guo)有(you)外源(yuan)DNA存(cun)在，就有(you)可能(neng)通過這(zhe)些孔洞(dong)進(jin)入(ru)細胞內部。具(ju)體(ti)步驟如(ru)下：
 

　　1. 制(zhi)備(bei)菌株(zhu)：選擇合適的菌株(zhu)，通常為大腸桿菌或其(qi)他(ta)常用(yong)的宿(xiu)主菌株(zhu)。
 

　　2. 生長(chang)培養(yang)：將(jiang)菌株(zhu)接種(zhong)於適宜(yi)的培(pei)養(yang)基中(zhong)，培養(yang)至(zhi)對數(shu)生長(chang)期。
 

　　3. 收集細胞：通過離心(xin)收集細菌細胞，並(bing)用(yong)適當的緩(huan)沖(chong)液洗(xi)滌。
 

　　4. 制(zhi)備(bei)感(gan)受(shou)態(tai)：將(jiang)洗(xi)滌後的細胞懸浮(fu)於緩(huan)沖(chong)液中(zhong)，調整細胞濃度至(zhi)適宜(yi)水(shui)平。
 

　　5. 電擊轉化：將(jiang)細胞懸液轉(zhuan)移(yi)到(dao)電(dian)擊(ji)杯(bei)中(zhong)，設置適當的電(dian)擊(ji)參(can)數(shu)進行(xing)電擊(ji)處理。
 

　　二(er)、電擊(ji)條(tiao)件的選(xuan)擇
 

　　電(dian)擊(ji)條(tiao)件的選(xuan)擇直(zhi)接影(ying)響到(dao)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)。理想的電(dian)擊(ji)條(tiao)件應該能(neng)夠(gou)大化地(di)使(shi)細胞處於感(gan)受態(tai)，同(tong)時(shi)又(you)要(yao)避(bi)免對(dui)細胞造(zao)成過多損(sun)傷(shang)。電(dian)擊參(can)數(shu)包(bao)括電(dian)壓(ya)、電容(rong)和電阻等(deng)，需(xu)要根據實際情況(kuang)進(jin)行優(you)化。
 

　　三、應用(yong)
 

　　它(ta)在基(ji)因(yin)工程和分子(zi)生(sheng)物(wu)學研究中(zhong)有著(zhe)廣泛的應用(yong)，主要(yao)包(bao)括：
 

　　1. 基(ji)因(yin)克(ke)隆(long)：將(jiang)目的基(ji)因(yin)插(cha)入(ru)到(dao)質(zhi)粒或染(ran)色體(ti)DNA中(zhong)，用(yong)於後(hou)續的表(biao)達(da)和分析(xi)。
 

　　2. 基因(yin)編(bian)輯(ji)：通過CRISPR/Cas9等(deng)基(ji)因(yin)編(bian)輯(ji)技(ji)術，對目標(biao)基因(yin)進(jin)行定點(dian)修(xiu)改(gai)。
 

　　3. 蛋(dan)白(bai)質(zhi)生(sheng)產(chan)：將(jiang)編(bian)碼(ma)某種(zhong)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的目的基(ji)因(yin)導入(ru)細菌，大量生產該蛋(dan)白(bai)質(zhi)。
 

　　4. 疫(yi)苗研(yan)發(fa)：用(yong)於構(gou)建(jian)含病(bing)原(yuan)體(ti)相(xiang)關基因(yin)的重(zhong)組(zu)菌株(zhu)，用(yong)於疫(yi)苗的研(yan)發(fa)和生產(chan)。
 

　　發根(電(dian)擊)感受(shou)態(tai)細胞作(zuo)為壹(yi)種(zhong)重要(yao)的生(sheng)物(wu)材(cai)料，為基(ji)因(yin)工程和分子(zi)生(sheng)物(wu)學研究提供了有(you)力工具。隨(sui)著相(xiang)關技術的不斷發展(zhan)，它(ta)的應用(yong)前景(jing)將(jiang)更加(jia)廣闊(kuo)。